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光照培養(yǎng)箱的無(wú)污染控制技術(shù)

更新時(shí)間:2015-12-28點(diǎn)擊次數(shù):1635
光照培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、安排 培育和某些特別微生物的培育,常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研討、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的搜集、各種物理、化學(xué)要素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研討和出產(chǎn)、培育雜交瘤細(xì)胞 出產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、安排工程、藥物挑選等研討范疇。光照培養(yǎng)箱是經(jīng)過(guò)在培育箱箱體內(nèi)模仿構(gòu)成一個(gè)相似細(xì)胞/安排在生物體內(nèi)的成長(zhǎng)環(huán)境如安穩(wěn)的溫度(37°C)、安穩(wěn)的 CO2水平(5%)、穩(wěn)定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)濕度(95%),來(lái)對(duì)細(xì)胞/安排進(jìn)行體外培育的一種設(shè)備。

在生物活體內(nèi),生物體有自身的免疫系統(tǒng)維護(hù)細(xì)胞或安排,可是在體外培育時(shí),沒(méi)有任何維護(hù)個(gè)人的免疫屏障。關(guān)于二氧化碳培育箱的基本參數(shù)溫度、CO2和 濕度,大多數(shù)培育箱都能滿(mǎn)意研討試驗(yàn)的需求??墒牵瑢?duì)準(zhǔn)培育進(jìn)程中面對(duì)的各種污染源,各品牌二氧培育箱的操控辦法和作用不盡相同,因而細(xì)胞體外培育中zui大 的要挾實(shí)際上是污染難題。

關(guān)于細(xì)胞來(lái)說(shuō),十分抱負(fù)的培育環(huán)境相同也合適這些污染物的生計(jì),培育箱自身是不會(huì)辨另外,而細(xì)胞培育中大有些時(shí)間里細(xì)胞都是坐落培育箱內(nèi),因而箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌十分要害!

細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培育基1-2天就會(huì)變色,對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)影響顯著,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系阻隔,滅菌后丟掉,還要用試驗(yàn)室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺(tái)。

病毒:由于病毒寄生生計(jì),迸發(fā)后趕快和正常細(xì)胞阻隔,丟掉處置,相對(duì)來(lái)說(shuō)簡(jiǎn)單處置,對(duì)操作者要挾較大;雖然病毒污染的細(xì)胞不影響原代培育,但出產(chǎn)疫苗是不安全的。因而,潛在病毒是細(xì)胞大量出產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制造中的難題。

真菌(霉菌和酵母菌):真菌成長(zhǎng)的比較慢,不象細(xì)菌那么簡(jiǎn)單被發(fā)現(xiàn),可是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;當(dāng)前沒(méi)有好的按捺辦法,包含如今常用的兩性霉素,一旦污染簡(jiǎn)單重復(fù)迸發(fā),特別孢子很難殺滅。

支原體:支原體污染后,由于它們不會(huì)使細(xì)胞逝世可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存,培育基通常不發(fā)生污濁,細(xì)胞無(wú)顯著變化,外觀上給人以正常感受,實(shí)則細(xì)胞現(xiàn)已遭到多方面潛在影響,如導(dǎo)致細(xì)胞變形,影響DNA組成,按捺細(xì)胞成長(zhǎng)等,往往被大多數(shù)試驗(yàn)者無(wú)視。
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